中国林蛙抗菌肽Temporin-1CEa基因的真核表达载体构建。

• 作者: 安铁洙 张志崇 张秋婷 朴善花 王春生 苗向阳
• 来源期刊: 经济动物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 中国林蛙 抗菌肽 绵羊成纤维细胞 瞬时表达
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 26-30
• 页数: 5页
• 分类号: S864.3
• 字数: 2054字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7448.2012.01.008

摘要

为了建立大量获取中国林蛙抗菌肽的方法,根据GenBank中的中国林蛙皮肤抗菌肽Temporin-1CEa基因的mRNA序列（EU624139）设计一对特异性引物,以提取的中国林蛙皮肤总RNA反转录出的cDNA为模板,将扩增的编码序列与pEASY-T3克隆载体连接获得Tem-T3;利用酶切、连接等分子生物学手段,将GFP基因连入Tem-T3克隆载体,再经酶切获得Tem-GFP片段,并插入真核表达载体pcDNA3.1,最终得到Tem-GFP-pcD-NA3.1重组质粒;利用脂质体转染法将该质粒转入绵羊成纤维细胞,48 h后可在荧光倒置显微镜下观察到GFP的绿色荧光表达;qPCR数据分析显示,与对照组相比,转染Tem-GFP-pcDNA3.1的绵羊成纤维细胞中融合蛋白Tem-GFP的表达量可提高约300倍。本研究为构建Temporin-1CEa基因山羊乳腺特异表达载体提供依据。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苗向阳	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	71	407	11.0	16.0
2	安铁洙	东北林业大学生命科学学院	75	199	8.0	10.0
3	王春生	东北林业大学生命科学学院	61	134	7.0	9.0
4	朴善花	东北林业大学生命科学学院	53	94	5.0	7.0
5	张志崇	东北林业大学生命科学学院	4	3	1.0	1.0
6	张秋婷	东北林业大学生命科学学院	13	37	3.0	5.0