应用噬菌体展示技术筛选兔出血症病毒抗原模拟表位

• 作者: 姜平 杨廷亚 王芳 胡波 范志宇 薛家宾 魏后军
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 兔出血症病毒 单克隆抗体 噬菌体展示技术 模拟表位
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1281-1286
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 5102字
• 语种: 中文

摘要

以抗兔出血症病毒(RHDV)的单克隆抗体A3c作为靶物质,应用噬菌体展示技术筛选RHDV抗原表位.将纯化的单抗A3c包被固相载体,经3轮亲和筛选后,挑取25株噬菌体单克隆并扩增,用EIISA测定后,提取阳性克隆单链DNA并测序,用阳性噬菌体克隆免疫小鼠制备高免血清,检测筛选抗原表位的免疫原性.结果表明:3轮亲和筛选后,特异性噬菌体克隆得到了有效富集,25株噬菌体单克隆中有19株为阳性克隆；测序结果表明,获得了与抗原高度同源的序列GTDDMDPGTTAA,即抗原的模拟表位,其中,氨基酸基序DXXDP为表位中的核心氨基酸；制备的小鼠高免血清与抗原具有较好的反应性,阳性噬菌体克隆与兔RHDV高免血清也具有较好的反应性.因此,该表位具有良好的免疫原性和反应原性.该研究为RHDV抗原表位的研究和新型疫苗的探索积累了资料.