胰蛋白酶消化法和组织块法原代培养人包皮成纤维细胞的比较

• 作者: 文政琦 李文亮 杨军 梁锐 王志强 邓俊 陈天星 陈明清
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 医学
• 关键词: 人包皮成纤维细胞 原代培养 胰蛋白酶消化法 组织块法 饲养层 人胚胎干细胞
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 242-247
• 分类号: R329.2
• 字数: 5394字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2012.03.011

摘要

小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)是目前国际上公认的人胚胎干细胞(hESCs)体外培养的饲养层细胞,但MEFs存在寿命短、动物源性污染等问题,需要探索适于hESCs体外培养且寿命长的人源性饲养层.采用胰蛋白酶消化法和组织块法分别原代培养人包皮成纤维细胞(hFFs),探索hFFs原代培养的最佳方法,为hFFs作为饲养层在hESCs研究中的应用提供可靠的科学依据;通过倒置显微镜下观察其生长状态和免疫细胞化学染色鉴定,结果显示两种原代培养方法获得的hFFs的形态及生物学特性均符合成纤维细胞;通过测定细胞生长曲线及MTT法检测,结果显示两种原代培养方法获得的不同代数的hFFs均具有较高的增殖活性,传代10余代仍能保持较好的细胞形态,可以制备成饲养层用于hESCs的研究.