果蝇心脏发育标记基因Kruppel的多克隆抗体制备

• 作者: 刘腾 吴秀山 朱玲 江志钢 邓云 雷旻音 黄婷
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Kruppel 融合蛋白 果蝇 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 252-256
• 分类号: Q71
• 字数: 2587字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2012.03.011

摘要

Kruppel在果蝇发育过程中起着重要的调控作用.为了进一步研究Kruppel的功能,需要制备Kruppel蛋白及其抗体.对已有的Kruppel序列进行分析,选取适当区域进行引物设计,从果蝇心脏cDNA文库中PCR扩增得到Kruppel部分编码区序列,并其连接到pET-28a载体上.将重组质粒(pET-28 a-Kruppel)转化rosetta受体菌,通过IPTG(Isopropyl β-D-thiogalactoside)诱导表达融合蛋白,用镍柱进行亲和纯化.将纯化得到的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western blot检测抗体的效价.