胃癌耐药细胞株SGC-7901/5-FU的建立及其耐药机制的初步探讨

• 作者: 刘金禄 徐瑜杰 毛远天 王震 裴明毓 陈业阳 陈俊强 黎伯培
• 来源期刊: 消化肿瘤杂志（电子版）
• 关键词: 多药耐药 氟尿嘧啶 胃癌 凋亡
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 163-169
• 页数: 7页
• 字数: 5946字
• 语种: 中文

摘要

目的构建耐5-FU的胃癌耐药细胞株,初步探讨细胞发生5-FU耐药的可能机制.方法 通过药物耐药间歇冲击并浓度梯度递增法诱导建立胃癌耐药细胞株SGC-7901/5-FU.应用MTT法检测亲代细胞对4种化疗药物的IC50并计算耐药指数(RI).通过MTT法绘制细胞的生长曲线计算细胞倍增时间.流式细胞仪分析细胞周期分布.RT-PCR检测抑癌基因P53、癌基因Bcl-2、促凋亡基因半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)、死亡相关蛋白激酶(death associated protein kinase,DAPK)家族成员(DAPK-1、DAPK-2、DAPK-3)、多药耐药蛋白(multidrug resistance proteins,MRP)亚家族中的MRP-6、多药耐药基因1(multidrug resistance 1,MDR1)、切除交叉互补修复基因(excision repair cross-complementing 1,ERCC-1)的表达.Western Blot检测MDR1 编码的P糖蛋白(P-gp)的表达水平.结果SGC-7901/5-FU对5-FU、顺铂、环磷酰胺的耐药指数分别为6.26、3.71、5.25.SGC-7901与SGC-7901/5-FU细胞倍增时间分别为(30.82±1.46)h和(46.01±4.15)h,SGC-7901/5-FU细胞增殖速率显著变缓(P＜0.05).与亲代细胞比较,耐药子株S期细胞显著减少,G0/G1期细胞则显著增高(P＜0.01),而G2/M期细胞无显著差异(P＞0.05).耐药子株SGC-7901/5-FU细胞MDR-1、MRP-6、DAPK-3和P-gp表达显著上调(P＜0.01),而ERCC-1、caspase-3、P53、DAPK-1、DAPK-2、Bcl-2的表达均无显著变化(P＞0.05). 结论成功构建胃癌耐5-FU细胞株SGC-7901/5-FU,其对顺铂、环磷酰胺具有交叉耐药,耐药机制与细胞周期S期细胞比例减少、G0/G1期细胞比例升高有关,可能与MDR-1、MRP-6、DAPK-3基因及P-gp蛋白表达上调有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘金禄	广西医科大学第一附属医院胃肠外科	25	59	6.0	6.0
2	陈俊强	广西医科大学第一附属医院胃肠外科	55	271	9.0	13.0
3	王震	广西医科大学第一附属医院胃肠外科	20	43	4.0	6.0
4	黎伯培	广西医科大学第一附属医院胃肠外科	8	7	1.0	2.0
5	毛远天	广西医科大学第一附属医院胃肠外科	6	8	2.0	2.0
6	陈业阳	广西医科大学第一附属医院胃肠外科	2	6	1.0	2.0
7	裴明毓	广西医科大学第一附属医院胃肠外科	1	6	1.0	1.0