RPA32蛋白原核表达、多克隆抗体制备及初步鉴定

• 作者: 任来峰 左斌 曾鸣 李明远 李莎 王欢 王海斌 郭莲娣
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RPA32 原核表达 多克隆抗体 复制蛋白A
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 120-123
• 页数: 4页
• 分类号: R373
• 语种: 中文

摘要

目的 原核表达人RPA32蛋白并制备其多克隆抗体,为后续RPA32的功能研究奠定基础.方法 以人cDNA文库为模板,构建原核表达质粒PET41a-RPA32,转化受体菌E.coli BL21,经IPTG诱导表达,采用GST亲和纯化方法获得GST-RPA32融合蛋白,将该融合蛋白免疫家兔制备RPA32多抗血清,最后采用Western blot检测其在多种肝细胞株中的特异性.结果 在受体菌E.coli BL21中成功诱导表达GST-RPA32融合蛋白,免疫家兔后获得高效价RPA32抗血清,Western blot检测证实该血清能够识别多种肝细胞株中的RPA32及CPT作用后出现的RPA32磷酸化条带.结论 成功制备兔抗人RPA32多克隆抗体,为RPA32在DNA损伤中的功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李明远		80	362	11.0	14.0
2	王欢		44	238	9.0	15.0
3	左斌		6	18	3.0	4.0
4	郭莲娣		4	9	2.0	3.0
5	李莎		19	163	4.0	12.0
6	王海斌		2	8	1.0	2.0
7	曾鸣		4	3	1.0	1.0
8	任来峰		2	3	1.0	1.0