新布尼亚病毒在非洲绿猴肾细胞中的培养与分离鉴定

• 作者: 刘国华 康锴 杜燕华 满瑞琴 许汴利 邓文斌 陈豪敏 马宏 马红霞 黄学勇
• 来源期刊: 中华预防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 病毒 Vero细胞 病毒培养 新布尼亚病毒
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 169-172
• 分类号: R1
• 字数: 3003字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2012.02.016

摘要

目的 应用非洲绿猴肾(Vero)细胞培养并分离鉴定新布尼亚病毒.方法 在2009-2011年河南省信阳地区发热伴血小板、白细胞减少综合征病例的血清标本中,筛选出新布尼亚病毒RT-PCR检测阳性且保存质量较好的164份标本,在Vero细胞系中培养,观察细胞致病变效应,进行实时荧光RT-PCR、间接免疫荧光检测和电镜观察.选取10份PCR阳性产物进行测序,测序结果与GenBank公布序列进行比对.结果 164份标本经Vero细胞培养,未观察到明显的特异性细胞病变；有67份实时荧光RT-PCR检测阳性,阳性率为40.85％.10份标本的核酸相似度在97.8％ ～ 100％之间,与新布尼亚病毒分离株(登录号HQ141600.1)相似度＞99％；67份实时荧光RT-PCR检测阳性标本中有58份间接免疫荧光检测可见特异性的荧光颗粒,对1份实时荧光RT-PCR和间接免疫荧光检测均为阳性的标本进行电镜观察,可见80～ 100 nm的球形病毒颗粒.结论 Vero细胞适用于新布尼亚病毒的培养、分离和鉴定.