大鳍鳠免疫球蛋白轻链3型基因cDNA的克隆及表达

• 作者: 张其中 李春涛 李超 杨莹莹 蒋自立 陈霞
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大鳍鳠 免疫球蛋白轻链3型基因 克隆 实时荧光定量PCR 表达
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 页码范围: 1011-1018
• 分类号: Q785|S917.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2012.27877

摘要

应用同源克隆和RACE-PCR方法获得大鳍鳠免疫球蛋白轻链3型(IgL3)基因的全长cDNA序列,并分析了该基因在组织中的表达.大鳍鳠IgL3的cDNA全长为947 bp,包含5 '非编码区58 bp,3′非编码区184 bp,开放阅读框705 bp,编码234个氨基酸.推测的蛋白质序列分为可变区(VL)和恒定区(CL).VL被进一步划分为4个骨架区(FR)和3个互补决定区(CDR).大鳍鳠与其它6种硬骨鱼类免疫球蛋白轻链L3氨基酸序列比对分析表明,大鳍鳠氨基酸序列与斑点叉尾鲴IgL3型(F型)的相似性最高,为68.8％,与南极鱼IgL3型的相似性最低,为47.2％.进化树分析表明,大鳍鳠IgL与斑点叉尾鲴IgL3型(F型)聚为一支并与其它硬骨鱼类IgL3型聚为一簇,明显与L1和L2进化支不同.实时荧光定量PCR显示,大鳍鳠IgL3基因主要在头肾、脾脏和血细胞中转录表达;注射嗜水气单胞菌后,头肾、脾脏和血细胞IgL3基因转录表达量有显著上升.研究表明,头肾、脾脏和血液是大鳍鳠IgL3型基因主要的表达器官,在免疫反应中起重要作用.