MicroRNA-450a-3p通过抑制Bub1基因的表达调控小鼠细胞增殖和胚胎发育

• 作者: 刘晨 施琼 李宝林 杨丹丹 湛晓琴 白慧丽 罗敏 蒋凤兵
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: MicroRNA-450a-3p 小鼠胚胎成纤维细胞 基因,Bub1 胚胎
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1651-1657
• 分类号: R394.2
• 字数: 6036字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2012.09.020

摘要

目的:探讨microRNA-450a-3p(miR-450a-3p)对小鼠细胞增殖和胚胎发育的调控是否通过抑制Bub1基因的表达实现.方法:用萤光素酶报告基因实验检测miR-450a-3p能否特异性结合于Bub1基因的3'-非翻译区(untranslated region,UTR);用Western blotting和实时荧光定量RT-PCR检测miR-450a-3p对Bub1蛋白和mRNA表达;分别通过MTT、Hoechst染色、流式细胞术等分析miR-450a-3p对小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)增殖、凋亡和细胞周期等生物学功能的调控;利用染色体核型分析技术检测miR-450a-3p对MEFs染色体数目的影响.结果:miR-450a-3p能与靶基因Bub1的3'-UTR结合,在翻译水平抑制MEFs中Bub1的表达,然而其转录水平的表达却不受影响.miR-450a-3p通过下调靶基因Bub1的表达,抑制MEFs的增殖,促进细胞的凋亡;而且miR-450a-3p还能使大多数细胞停滞在G1/G0期,使细胞分裂受阻,导致细胞染色体数目异常.结论:miR-450a-3p能够调控靶基因Bub1的表达,抑制MEFs增殖,并最终影响小鼠胚胎的发育.