二硫键形成促进双载体转断裂B区缺失型凝血因子Ⅷ基因

• 作者: 刘泽隆 屈慧鸽 朱甫祥 杨树德 缪静 迟晓艳
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: B区缺失型凝血因子Ⅷ 双载体 转基因 链间二硫键
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 181-187
• 页数: 7页
• 分类号: Q5|Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1206.2011.00296

摘要

双载体共转B区缺失型凝血因子Ⅷ(BDD-FⅧ)重链和轻链基因是克服腺相关病毒载体(AAV)容量限制的一种策略,但重链分泌的低效性产生链不均衡性,影响转基因的功效.假设重、轻链链间二硫键形成可提高双载体转BDD-FⅧ基因的功效,本文将BDD-FⅧ的重链A2区的Met662和轻链A3区的Asp1828突变为Cys.双载体培养的COS-7细胞共转染突变重链和轻链基因,Western blot显示细胞内二硫键交联的重、轻链蛋白形成,ELISA和Coatest分析细胞培养上清的BDD-FⅧ重链分泌量和生物活性,分别为(109±13) μg/L和(0.65±0.12) U/ml,明显高于共转野生型重链和轻链基因细胞((71±11) μg/L和(0.35±0.05)U/ml).结果表明,链间二硫键形成可提高双载体转BDD-FⅧ基因的功效,为进一步动物体内运用双AAV载体转BDD-FⅧ基因提供了实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	屈慧鸽		72	330	10.0	15.0
2	刘泽隆		49	99	7.0	9.0
3	缪静		57	250	10.0	14.0
4	朱甫祥		38	21	3.0	4.0
5	迟晓艳		47	54	4.0	6.0
6	杨树德		27	167	6.0	12.0