大鼠心包膜组织WT1阳性细胞的分离、培养和生物学特性(附视频)

• 作者: 孟群 王晓明 聂良明 许林海
• 来源期刊: 中华移植杂志（电子版）
• 关键词: 心包 干细胞 WT1 心肌细胞 细胞分化 视频
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 118-124
• 页数: 7页
• 字数: 5481字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1647-3903.2012.02.008

摘要

目的 了解大鼠心包膜组织中分离和培养干细胞的可行性、细胞特性和分化成心肌细胞的能力,为心包膜组织干细胞用于心脏疾病细胞治疗提供理论依据.方法 取Wistar大鼠制备心肌梗死模型后取心包组织,胶原酶消化法分离心包膜组织干细胞,并进一步梯度离心纯化,培养并适时传代,测定其生长曲线;分别用流式细胞仪和免疫组织化学法检测分离细胞的免疫表型.用5-氮杂胞苷诱导心包膜组织干细胞向心肌细胞分化,分化后的细胞表型分别用免疫组织化学法和反转录PCR分析检测.结果 分离细胞成梭状,体外培养呈良好增长,组织形态与心脏干细胞相似.免疫表型呈CD29、CD44、CD90阳性,部分呈CD106阳性,而CD34和CD45阴性;95%为WT1阳性细胞,并有少量的c-kit、心脏肌钙蛋白T、GATA-4、KDR阳性细胞.在药物诱导7 d后,部分细胞聚集成细胞团,可见单个细胞开始自发性博动,可以观测到明显的肌小节结构,并同时有心源性转录因子和结构蛋白在转录水平表达.结论 心包膜组织干细胞具有间充质干细胞的基本特征,并具有多样免疫表型,其中以WT1阳性细胞为主;纯化的WT1阳性细胞具有定向分化心肌细胞的潜能,提示心包膜组织可以作为心脏疾病细胞治疗的供体来源之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许林海	浙江省人民医院心胸外科	49	137	6.0	9.0
2	王晓明	浙江省人民医院心胸外科	8	31	3.0	5.0
3	聂良明	浙江省人民医院心胸外科	10	16	3.0	3.0
4	孟群	浙江省人民医院病理科	23	73	5.0	7.0