茎-环RT-PCR法定量miRNA-421的引物设计

• 作者: 杨洋 温传俊 赵丽
• 来源期刊: 南京师大学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 茎-环RT-PCR miRNA-421 引物设计
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 83-88
• 分类号: Q28
• 字数: 3359字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-4616.2012.02.016

摘要

本研究旨在通过茎环RT-PCR法,建立有效定量miRNA-421的PCR方法,探讨该方法在定量检测miRNA方面的应用价值.利用miRBase数据库获得miRNA-421的成熟序列.设计3条miRNA-421特异性反转录引物,Q-PCR上游引物及通用下游引物.通过10倍梯度稀释RNA后特异性反转录,RT-PCR分析不同引物互相配对PCR的扩增曲线及熔融曲线,鉴定出特异性好、扩增效率高的引物.为进一步鉴定引物的有效性,过表达miRNA-421,用鉴定的成熟引物定量扩增.利用茎-环RT-PCR法设计、鉴定出miRNA-421引物:421RT7、F19,且这对引物特异性好、扩增效率高.通过设计引物组合,茎-环RT-PCR法能够很好地用于miRNA定量分析,并具有准确、快速、节约成本的优点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵丽	南京师范大学生命科学学院分子细胞生物学研究所	31	137	8.0	10.0
2	杨洋	南京师范大学生命科学学院分子细胞生物学研究所	11	46	3.0	6.0
3	温传俊	南京师范大学生命科学学院分子细胞生物学研究所	15	39	4.0	5.0