人β-防御素DEFB113的重组表达及活性鉴定

• 作者: 于合国 刁华 林东海 董靖 郭晨云
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 原核表达 载体pTWIN1 人β-防御素DEFB113 抑菌活性 溶血活性
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: Q516
• 语种: 中文

摘要

DEFB113为人β-防御素家族新成员,其生物学功能尚不清楚.为了探索一种可以较低成本和较高产量表达活性DEFB113多肽的方法,将编码DEFB113成熟肽的序列克隆到载体pTWIN1上,并转化至E.coliBL21 (DE3)中进行表达.结果表明融合蛋白主要以可溶形式存在；重组载体中融合标签的几丁质结合域(CBD)和内含肽(intein)分别使亲和层析纯化和融合标签自剪切一步完成.最终得到DEFB113多肽的产率为6～7 mg/LLB.经活性鉴定,该重组DEFB113多肽对于S.aureus,E.coli K12D31和C.albicans均表现出较强的抑制作用；另外DEFB113无明显的溶血活性,是一种较理想的多肽抗生素.该研究为进一步研究DEFB113的生理功能以及其它人β-防御素结构与功能奠定了基础.