马铃薯SGAs合成代谢途径末端SGT酶基因克隆及序列分析

• 作者: 张俊莲 张金文 牛继平 王旺田 王蒂 陆艳梅
• 来源期刊: 草业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 马铃薯 糖苷生物碱 茄啶糖苷转移酶 基因克隆 生物信息学分析
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 106-116
• 分类号: Q943.2|S532.03
• 字数: 5581字
• 语种: 中文

摘要

糖苷生物碱(SGAs)是一类存在于茄科植物和百合科植物的重要次生代谢物,与植物抗逆性和产品品质有密切关系,同时在医药上具有广泛的药理学活性.茄啶:糖基转移酶(SGT)为SGAs合成代谢途径末端关键酶,研究其基因结构及其编码的酶蛋白特性,对于调控植物体内SGAs合成及其通过微生物发酵生产SGTs有重要的作用和意义.通过生物信息学分析方法预测3个糖基转移酶cDNA编码的酶蛋白结构和特性.以马铃薯块茎表皮总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增出3个糖基转移酶(SGT1、SGT2和SGT3)基因片段并克隆到pMDR 19-T载体.阳性克隆经PCR鉴定后进行测序,序列分析结果表明,克隆到的sgt1、sgt2和sgt3三个同源的序列片段(1 467～1 518 bp),编码488～505个氨基酸;所得序列与GenBank中注册的高等植物SGT酶基因核苷酸序列(U82367.2、DQ 218276.1和DQ 266437)的同源性均在99.12％以上,氨基酸同源性达到99％以上,3个基因都具有UDPG糖基转移酶保守结构域及许多重要功能位点;PI为5.52～5.62.三级结构预测表明,该氨基酸同糖基转移酶单体结构模型相似,都为糖基转移酶家族成员,具有合成类固醇糖苷生物碱的功能,基因序列已注册到GenBank,序列注册号分别为:sgtl,JN695005;sgt2,JN695006;sgt3,HM188447.