人β - actin蛋白原核表达及其单克隆抗体制备

• 作者: 刘如石 刘胜姿 吴俊文 李烨 熊璎珞 许凤 邱义兰 鲁健
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 原核表达 电洗脱 单克隆抗体 β-actin
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 238-244
• 分类号: Q813.2
• 字数: 6970字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2012.03.009

摘要

为获得分泌抗人β-actin蛋白单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞,通过在大肠杆菌中原核表达人β-actin 蛋白,以纯化的人β-actin蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠.经过细胞的融合及筛选获得1株能稳定分泌抗人β-actin蛋白McAb的杂交瘤细胞,命名为2B4.采用间接ELISA和Western blot方法对McAb的特异性、稳定性和适用范围进行鉴定.结果显示:蛋白的相对分子质量为43 kDa,可溶于8 mol/L尿素;杂交瘤细胞上清的抗体效价为1×105,腹水的抗体效价为1×107;间接ELISA结果表明,杂交瘤细胞在体外传20代或液氮冻存3个月后,分泌的抗体效价不变;37℃保存24 h后,抗体的效价开始下降.Western blot结果显示,单克隆抗体识别人、鼠、兔和鱼的β-actin蛋白,与其发生特异性反应.2B4分泌的单克隆抗体可以广泛的应用于细胞生物学和免疫学试验,具有良好的应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱义兰	湖南师范大学生命科学学院	23	124	7.0	10.0
2	刘如石	湖南师范大学生命科学学院	34	210	8.0	13.0
3	李烨	湖南师范大学生命科学学院	12	59	4.0	7.0
4	刘胜姿	湖南师范大学医学院	21	108	6.0	10.0
5	许凤	湖南师范大学生命科学学院	4	16	2.0	4.0
6	吴俊文	湖南师范大学生命科学学院	4	15	2.0	3.0
7	熊璎珞	湖南师范大学生命科学学院	1	2	1.0	1.0
8	鲁健	湖南师范大学生命科学学院	1	2	1.0	1.0