miR-570对胃癌细胞B7-H1蛋白表达的抑制作用

• 作者: 孙静 张学光 朱健洁 李锐 杨鹏 汪维鹏
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: miR-570与B7-H1 SGC7901细胞、MDA-MB-435细胞与CHO细胞 重组质粒 双荧光素酶报告系统
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 270-275
• 页数: 6页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文

摘要

B7-H1是一种重要的负性共刺激分子,在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用,而微小RNA具有直接的转录后调控作用.本文研究miR-570对B7-H1表达的调控作用.首先将miR-570及其抑制剂anti-miR-570分别转染B7-H1表达阳性的人胃癌细胞SGC-7901和B7-H1表达阴性的人乳腺癌细胞MDA-MB-435,以流式细胞术检测B7-H1分子表达情况；然后构建pcDNA/B7-H1表达质粒与miR-570共转染CHO细胞,以流式细胞术检测CHO细胞上B7-H1分子的表达情况；最后分别构建含B7-H1基因3'-UTR片段和含miR-570作用靶点序列的荧光素酶表达载体与miR-570共转染CHO细胞,用双荧光素酶报告系统检测荧光素酶活性.结果显示miR-570能显著抑制SGC-7901细胞和B7-H1基因转染细胞膜上B7-H1蛋白的表达,并能显著抑制荧光素酶表达载体表达的荧光素酶蛋白,而且anti-miR-570能上调MDA-MB-435细胞上B7-H1表达.本研究证明miR-570能显著抑制B7-H1蛋白表达,为通过抑制B7-H1信号通路以增强机体抗肿瘤免疫力的治疗途径奠定了基础.