碎米荠CarKCS基因全长CDS克隆、序列分析及表达载体构建

• 作者: 刘春林 杨慧 阮颖 魏解冰
• 来源期刊: 作物研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 碎米荠 β-酮脂酰-CoA合酶(KCS)基因 序列分析 表达载体构建
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 213-218
• 分类号: Q78
• 字数: 3935字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5280.2012.03.03

摘要

根据KCS基因的保守性设计引物,以高神经酸含量的碎米荠叶片DNA为模板(KCS基因无内含子),克隆碎米荠超长链脂肪酸合成的限速酶β-酮脂酰- CoA合酶(KCS)基因全长CDS序列,命名为CarKCS.Blast 比对及序列分析表明,目的片段序列和GenBank上报道的拟南芥KCS18序列同源性达到87％.CarKCS全长1518bp,不含内含子,编码505个氨基酸.生物信息学分析表明,所有的酶功能活性位点的氨基酸都存在,在N端都有两个,C端有一个高度疏水的跨膜结构域；CarKCS与KCS18同属于KCS基因家族的FAE1 - like亚家族.将目的片段连接到pFCC -5941.nap表达载体,经PCR和酶切检测,证明已成功构建了pNapin- CarKCS载体.