miR-126在胃癌中的表达及其靶基因Crk的鉴定

• 作者: 于颖彦 冯润华 朱正纲 李建芳 燕敏 苏丽萍 陈雪华
• 来源期刊: 外科理论与实践
• 学科: 医学
• 关键词: 胃癌 microRNA Crk
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 359-365
• 分类号: R735.2
• 字数: 6325字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-9610.2012.04.017

摘要

目的:分析miR-126在胃癌中的表达水平并鉴定miR-126的靶基因,以阐明miR-126在胃癌发生机制中的功能.方法:采用qRT-PCR分别检测miR-126在胃癌细胞株、正常胃黏膜组织、永生化胃黏膜上皮细胞、胃癌及配对癌旁组织的表达水平,并与胃癌组织的临床病理指标进行相关性分析.采用生物信息学方法预测出miR-126的靶基因,并通过荧光素酶报告系统加以验证;采用qRT-PCR及Western印迹法检测miR-126对靶基因mRNA及蛋白质表达水平的影响.结果:qRT-PCR检测结果显示,miR-126在胃癌细胞株中的表达水平明显低于其在正常胃黏膜组织及永生化胃黏膜上皮细胞株的表达水平.miR-126在60例病人的胃癌组织中表达的水平显著低于其在配对癌旁组织中表达的水平;且胃癌组织miR-126表达水平低者,肿瘤组织体积较大,胃壁浸润较深,易发生淋巴结转移,病理分期也较晚.生物信息学分析提示Crk mRNA的3'UTR含有miR-126直接作用的靶序列,荧光素酶报告系统检测进一步验证了该靶序列,qRT-PCR及Western印迹法证实miR-126对Crk蛋白表达的调控发生在转录后水平.结论:miR-126有望成为研究胃癌的新型标志物;miR-126通过对其靶基因Crk的调控参与了胃癌的发生、发展过程.