弧菌外膜蛋白ompk工程菌规模化培养表达初探

• 作者: 任燕 孙承文 李宁求 石存斌 赖迎迢 陶家发
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 哈维氏弧菌 外膜蛋白 Ompk基因 亚单位疫苗
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 开发与应用
• 页码范围: 72-75
• 分类号: Q815
• 字数: 2398字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2012.04.97

摘要

目的:为Ompk亚单位疫苗生产提供参数.方法:利用振荡和发酵培养,测定不同培养时间的菌液浊度和蛋白诱导表达效果.结果:工程菌30℃摇瓶培养10h,种子罐培养8～10h,较为合适；摇瓶和5L发酵罐诱导表达培养,升温42℃诱导表达,7h效果较佳；经5批次50L、500L发酵罐诱导表达培养,均可得到重组蛋白表达的工程菌体,50L和500L发酵罐最高生物量分别为5.32g/L和6.38g/L,平均可达到3.75 g/L和4.74 g/L;适当延迟升温诱导前的培养时间,可提高工程菌的得率.结论:初步确定了重组蛋白工程菌规模化诱导表达培养方法,利用500L发酵罐培养可得到诱导表达的工程菌体.