不同浓度谷氨酰胺对大鼠脂肪间充质干细胞体外培养的影响

• 作者: 唐明生 戴刚 王慧深 覃有振
• 来源期刊: 新医学
• 关键词: 间充质干细胞 脂肪细胞 成骨细胞 多向分化 L-谷氨酰胺
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 322-326,封3
• 分类号: R329
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/g.issn.0253-9802.2012.05.013

摘要

目的:探讨不同浓度左旋谷氨酰胺(L-谷氨酰胺)对大鼠脂肪间充质干细胞(AD-MSC)体外培养的影响.方法:取SD大鼠腹股沟处皮下脂肪分离获取AD-MSC,接种至含10%胎牛血清的完全培养液的细胞培养瓶中.24 h首次换液后分为2 mmol/L L-谷氨酰胺组(2 mM组)和0.5 mmol/L L-谷氨酰胺组(0.5 mM组),分别进行体外培养并及时传代.两组各取第1、3代AD-MSC,每代各接种7块96孔板,每24 h各取一块96孔板用噻唑蓝(MTT)测定其生长曲线.两组各取第3代细胞进行成脂和成骨诱导分化,成脂鉴定使用油红O染色,成骨鉴定使用碱性磷酸酶及冯库萨染色.另各取第3代细胞在流式细胞分析仪上行CD29、CD31、CD44、CD45表面分子检测.最后进行细胞冻存及复苏实验.结果:从大鼠脂肪组织分离出的AD-MSCs在两种L-谷氨酰胺下均能稳定生长、增殖,2 mM组生长曲线较0.5 mM组上移,细胞生长加速.两组第三代细胞均能向成骨和成脂方向分化,细胞表面抗原标志相同,即CD29 及CD44高表达,CD31、CD45几乎不表达.两组培养的AD-MSC在液氮中冻存2个月后,细胞生长、增殖活性及多向分化能力无明显降低.结论:两种L-谷氨酰胺浓度体外培养的大鼠AD-MSC均可稳定生长、增殖,2 mmol/L L-谷氨酰胺的细胞增殖速度比0.5 mmol/L可能更快,但两种L-谷氨酰胺浓度对AD-MSCs多向分化潜能、表面抗原表达及冻存后复苏的细胞活力等生物特性无明显影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王慧深	中山大学附属第一医院心儿科	37	110	6.0	8.0
2	戴刚	中山大学附属第一医院卫生部辅助循环实验室	19	94	6.0	9.0
3	覃有振	中山大学附属第一医院心儿科	42	131	7.0	8.0
4	唐明生	中山大学附属第一医院心儿科	1	5	1.0	1.0