HIV-1辅助蛋白Vpr多肽抗体的制备与鉴定

• 作者: 吕建新 孙俊 孟哲峰 张晓燕 徐建青
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: HIV-1辅助蛋白Vpr B细胞表位 表位预测 多肽抗体
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 151-157
• 页数: 7页
• 分类号: R373.9
• 语种: 中文

摘要

预测Vpr蛋白的B细胞抗原表位,并利用合成的B细胞表位肽制备Vpr特异性抗体.应用生物信息学技术获得Vpr蛋白共享氨基酸序列并预测其潜在B细胞抗原表位,与载体蛋白血蓝蛋白(KLH)偶联合成多肽并免疫家兔,鉴定及纯化获得的多肽特异性抗体.软件预测显示,Vpr蛋白N端的第3～19位(N)和C端的第82～95位(C)氨基酸序列为潜在B细胞抗原表位;ELISA检测抗血清中多肽特异性抗体的效价都达到1∶105以上;Western-Blotting结果显示,无论对HIV-1 B亚型还是CRF07_BC重组型的Vpr蛋白,其多肽N抗体和C抗体均能特异性识别;免疫沉淀结果显示,Vpr多肽N和C抗体也能特异性结合未变性的野生型Vpr或GFP -Vpr融合蛋白.利用生物信息学技术能成功预测Vpr蛋白B细胞抗原表位,免疫所获得的抗体具有较好的特异性和应用性.