一种简便大豆原位转基因方法研究

• 作者: 刘杰 洪慧龙 邱丽娟 郭兵福
• 来源期刊: 大豆科学
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆 根癌农杆菌 顶芽 原位转化
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 347-352,357
• 分类号: S565.1
• 字数: 4959字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9841.2012.03.003

摘要

以萌发大豆幼苗顶芽为外植体,经纵切及农杆菌侵染后种植到大田中,转化植株用除草剂进行表型鉴定,存活植株进行PCR验证,并分析目的基因EPSPS在T2代转基因植株中的遗传情况；总计获得草铵膦涂抹表型鉴定阳性T0植株75株,草甘膦喷雾鉴定阳性T1植株65个,PCR测序阳性T1植株6个,PCR测序检测转化效率为0.14％；获得T2代PCR阳性植株52个,初步证明目的基因EPSPS能在子代中遗传；该方法能有效解决基因型依赖及再生植株困难等问题,缩短转化周期,为根癌农杆菌阶段的大豆遗传转化体系的优化与改良提供了参考.