假定蛋白CT440在沙眼衣原体感染细胞中的定位研究

• 作者: 吴移谋 周洲 李忠玉 粟盛梅 钟光明 陈超群 黄秋林
• 来源期刊: 中国科学（生命科学）
• 关键词: 沙眼衣原体 CT440 包涵体膜蛋白
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 64-70
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.1007/sl1427-011-4243-1

摘要

包涵体膜蛋白在沙眼衣原体致病过程中发挥重要的作用.为确定假定蛋白CT440在沙眼衣原体感染细胞中的定位及特征,本研究采用PCR方法从D型沙眼衣原体的基因组中扩增Ct440基因,克隆入pGEX-6p原核表达载体构建pGEX-6p/Ct440原核表达重组体,重组体转化到XL1-blue大肠杆菌,IPTG诱导表达融合蛋白GST-CT440.纯化后的CT440融合蛋白免疫小鼠制备抗体,间接免疫荧光(IFA)和Western blot测定抗体的特异性.特异性抗体用于分析CT440蛋白在衣原体感染细胞内的定位、表达时相特征及其对衣原体感染的影响.结果表明,CT440蛋白定位于沙眼衣原体包涵体膜上,为沙眼衣原体包涵体膜蛋白；该蛋白在衣原体感染12h后开始表达,直至持续到整个感染周期；转基因在胞浆表达的CT440融合蛋白不影响其后的衣原体感染.本实验为深入研究农原体与宿主细胞间的相互作用,阐明衣原体致病机制提供了重要的实验依据.