TFR和VEGF基因双顺反子慢病毒感染骨髓内皮祖细胞的研究

• 作者: 孙立军 宦怡 程康 袁远 路凡 郑敏文 魏梦绮
• 来源期刊: 心脏杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 双顺反子 慢病毒载体 转铁蛋白受体 血管内皮生长因子 内皮祖细胞
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 173-176
• 页数: 4页
• 分类号: R512.99
• 语种: 中文

摘要

目的:研究转铁蛋白受体(transferrin receptor,TFR)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的双基因共表达慢病毒载体是否能介导目的基因在中华小型猪骨髓内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)中的有效表达.方法:通过分子克隆技术构建双顺反子慢病毒表达载体pLenti-GFP-TIR；分离培养中华小型猪骨髓EPCs,用流式细胞仪(FCM)检测细胞表面抗原CD31和Flk-1的表达；并利用Lipofectin 2000将含目的基因的转移质粒与pRsv-REV、pMDlg-pRRE及pMD2G共转染293T细胞并进行慢病毒包装.72 h后,收集病毒上清,感染中华小型猪骨髓EPCs,并通过RT-PCR法检测TFR和VEGF基因的表达.结果:①成功地构建了双顺反子慢病毒表达载体pLenti-GFP-TIR;②FCM检测证实,分离的细胞为骨髓EPCs;包装好的慢病毒颗粒可成功地感染中华小型猪骨髓EPCs；③RT-PCR法检测表明,TFR和VEGF呈高水平的表达.结论:TFR和VEGF基因双顺反子慢病毒载体Lenti-GFP-TIR可有效地转移目的基因至中华小型猪骨髓EPCs中,并成功地表达目的基因,为进一步探讨移植细胞分子成像奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙立军		87	455	11.0	15.0
2	宦怡		247	1896	21.0	26.0
3	郑敏文		130	842	15.0	21.0
4	程康		27	128	6.0	10.0
5	路凡		28	109	6.0	8.0
6	魏梦绮		59	469	12.0	18.0
7	袁远		7	61	3.0	7.0