毕赤酵母表达重组猪肾氨基酰化酶I的纯化与鉴定

• 作者: 刘志刚 杨波 胡征 邓贝
• 来源期刊: 食品与发酵科技
• 学科: 工学
• 关键词: 氨基酰化酶I 毕赤氏酵母 表达纯化 热稳定性
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 页码范围: 95-99
• 分类号: TQ926
• 字数: 3391字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-506X.2012.04-027

摘要

运用毕赤氏酵母对猪源重组氨基酰化酶Ⅰ(pACY1)进行了表达,并对其酶学参数进行了测定.构建毕赤氏酵母工程菌GS115-pacy1,通过甲醇诱导表达后,进行了Phenyl-Sepharose及Q-Sepharose两步色谱纯化;对纯化后重组pACY1的动力学参数进行测定.重组pACY1纯化后呈均一性,其纯度为98.6%;酶学参数测定结果表明,重组酶的比活力(Vmax)为280U/mg,米氏常数(Km)为0.91mM,接近天然酶对应的287U/mg 和0.84mM;而酵母重组酶 Tm 值为74℃,高于天然酶的70℃.毕赤氏酵母表达重组pACY1的酶活性与天然酶相当,且其热稳定性优于天然酶.这为氨基酸拆分产业提供了更加优质而丰富的酶制剂.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡征	湖北工业大学生物工程学院	32	156	6.0	12.0
2	刘志刚	湖北工业大学生物工程学院	14	40	3.0	5.0
3	杨波	湖北工业大学生物工程学院	30	53	4.0	6.0
4	邓贝	湖北工业大学生物工程学院	4	6	2.0	2.0