摘要:
目的 拟建立一种稳定、可连续动态直接观察皮肤创口感染的动物模型. 方法 制作小鼠背部全层皮肤切割伤模型,即刻予以皮下缝合后按随机数字表法分为四组:A组小鼠接种50μl无菌PBS液(PBS对照组),B、C、D组(感染组)小鼠分别接种50μl含1×106、1×108和1×1010菌落形成单位(colony forming unit,CFU)/ml可发光耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin- resistant staphylococcus aureus,MRSA)菌株悬液.观察接种后每组小鼠的饮食活动,并记录12,3,5,7,9,11,14 d的平均体重及其死亡率;接种后各时相点采用以电荷耦合器件(charge - couplddevice,CCD)为基础的成像系统记录小鼠创口的荧光素发光强度;接种后24 h切取创口局部组织HE染色,观察各组小鼠创口炎症反应情况;记录每组小鼠创口愈合时间. 结果 (1)平均体重:A、B组小鼠无明显波动;C组逐渐减轻,第3天后逐渐增加,第14天增至接种前水平;D组逐渐减轻直至死亡.(2)死亡率:A、B组为零,C组第14天小鼠死亡率为10%,D组小鼠至接种后第3天死亡率为100%.(3)创口荧光素发光强度:A、B组自接种当天起均逐渐减弱,分别至第5,7天接近完全消失;C组自接种当天起至第14天无明显增强和减弱迹象;D组自接种当天起逐渐增强,且范围逐渐扩大直至死亡.(4)接种后24 h HE染色:四组小鼠创口均有炎症细胞浸润,C、D组浸润更明显.(5)创口愈合时间:A、B组分别于接种后第5,7天愈合;C组至第14天仍未愈合,且切口长度及范围未见明显扩大与减小;D组创口范围自接种当天起逐渐扩大直至死亡. 结论 小鼠皮肤全层切割伤创口接种50μl含1×108 CFU/ml可发光MRSA菌株悬液,可直接实时动态连续观测创口感染的发生与发展,该感染模型易于制作,稳定和重复性高.