转基因小麦根际土壤镰刀菌Real-time QPCR方法的建立及应用

• 作者: 史建荣 吴季荣 曹欢 林凡云 王秀宇
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 转基因小麦 镰刀菌 实时荧光定量PCR 绝对定量
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 加工贮藏·质量安全
• 页码范围: 1163-1167
• 分类号: S154.3
• 字数: 3561字
• 语种: 中文

摘要

对转基因抗病小麦根际土壤中镰刀菌含量进行绝对定量,建立了实时荧光定量PCR(Real-time QPCR)检测体系.应用该反应体系,对转基因小麦各个生长时期的镰刀菌拷贝数进行绝对定量.结果表明,镰刀菌通用引物具有较好的特异性;Real-time QPCR反应的扩增曲线中各梯度标准质粒的循环阈值间隔均匀,溶解曲线峰值较突出,该标准曲线的相关系数(r)=0.99920,斜率为-3.203,计算其扩增效率为105％,符合荧光定量PCR方法中对各项指标的要求.应用试验结果表明,在转基因小麦的播种前期、灌浆期、成熟期镰刀菌数量较低,在苗期、返青期、拔节期镰刀菌数量较高.