钙化纳米微粒诱导人肾小管上皮细胞自噬的研究

• 作者: 刘建河 潘骏 齐隽
• 来源期刊: 中华泌尿外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 钙化纳米微粒 人肾小管上皮细胞 自噬
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 37-40
• 分类号: R318.16
• 字数: 2842字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1000-6702.2012.01.012

摘要

目的 观察不同浓度钙化纳米微粒( calcifying naniparticles,CNP)对人肾小管上皮细胞HK-2生长的影响,探讨CNP是否可以诱发体外培养HK-2细胞的自噬作用. 方法 将0.0125、0.025、0.05、0.1 mg/ml等4种浓度CNP加入对数生长期的HK-2细胞,培养12、24、48、72 h后,MTT法检测HK-2细胞生长、增殖情况.EGFP-LC3表达质粒转染体外培养HK-2细胞,培养24 h后,加入CNP共同孵育,作用3、6、24、48 h后收集细胞,透射电镜下检测CNP作用后HK-2细胞自噬体的形成,荧光显微镜检测CNP作用前后HK-2细胞LC-3斑点的形成情况. 结果 CNP对HK-2细胞的生长抑制作用随着CNP浓度的升高和作用时间的延长而增强,0.05 mg/ml CNP作用48 h后HK-2细胞增殖抑制率为14.5％,0.1 mg/ml CNP作用72h后抑制率达21.5％.加入CNP 6 h后透射电镜下可见CNP聚集形成结晶样物并黏附于HK-2细胞表面,HK-2细胞质内见散在的自噬体形成.荧光显微镜下可见转染EGFP-LC3的HK-2细胞质内散在分布的LC-3荧光斑点. 结论 CNP可以诱发HK-2细胞的自噬作用,可能在肾结石等生物矿化相关疾病发生中起重要的作用.