食淀粉乳杆菌淀粉酶基因在E.coli中的克隆表达

• 作者: 张玉彬 赵文锋 陈孝礼
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 食淀粉乳杆菌 α-淀粉酶 克隆与表达 活性分析
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 283-286
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

以食淀粉乳杆菌(Lactobacillus amylovorus)总DNA为模板,通过PCR扩增得到约1.3kb的α-淀粉酶基因保守区片段amyC.经双酶切插入到表达载体pET-32a的NcoI和NotI之间,转化大肠杆菌BL21( DE3)菌株.经IPTG诱导表达后,发酵液淀粉酶总活性为3 623 u/L,培养液上清和细胞破碎液上清均有淀粉酶活性,分别为3.3 u/mL和14.1 u/mL.破碎上清经镍柱纯化后,得到单一的目的条带,纯化蛋白的比活力为26.9 u/mg蛋白,比纯化前(3.9 u/mg蛋白)提高了大约7倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张玉彬		51	314	9.0	16.0
2	赵文锋		8	40	3.0	6.0
3	陈孝礼		1	0	0.0	0.0