转天蚕素AD(CAD)基因于紫花苜蓿的研究

• 作者: 万秋 刘秀明 朱海林 李校堃 李海燕 杜淑环
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 紫花苜蓿 抗菌肽 天蚕素AD 转基因
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 生物学
• 页码范围: 498-502
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3918字
• 语种: 中文

摘要

为了探索利用紫花苜蓿Medicago sativa作为生物反应器生产杂合抗菌肽天蚕素AD(Cecropin AD,CAD)的可行性,通过PCR搭桥方法合成了CAD全长基因,并插入对外源基因表达有一定促进作用的调控元件:Ω序列、Kozak序列及KDEL四肽序列,然后将改造后的CAD基因克隆进载体pCAMBIA1390R,构建了pCAMBIA1390R-CAD植物表达载体.将重组质粒转入根癌农杆菌Agrobacterium tumefacienLBA4404,并通过农杆菌介导方法将CAD基因转化入紫花苜蓿.在含潮霉素(20 mg/L)的筛选培养基上筛选转基因植株,通过PCR、Southern blotting检测,CAD基因已经转入紫花苜蓿中；提取蛋白质进行抑菌活性研究,结果表明转基因苜蓿蛋白提取物对沙门氏菌Salmonella及金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus具有一定抑菌活性.