神经鞘磷脂合成酶2基因敲除小鼠海马神经细胞自噬现象

• 作者: 张俊士 文曙光 曹瑞萍 臧建峰 邓锦波 鲁广秀
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 神经鞘磷脂合成酶2 自噬 海马神经细胞 神经酰胺 免疫荧光 免疫印迹法 小鼠
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 神经生物学
• 页码范围: 299-305
• 分类号: Q189
• 字数: 6568字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2012.03.003

摘要

目的 利用神经鞘磷脂合成酶2( SMS2)基因敲除小鼠探讨神经酰胺对海马神经细胞自噬现象的影响. 方法 将SMS2杂合子(SMS2+/-)小鼠采用杂交、回交、互交的方法进行繁殖,用酚-氯仿提取法提取小鼠基因组DNA,PCR扩增目的基因,琼脂糖凝胶电泳对小鼠基因型作出鉴定,建立纯合子(SMS2-/-)小鼠模型；采用透射电子显微镜、免疫荧光染色及Western blotting技术观察生后第7天(P7)、P14和P30 SMS2-/-小鼠海马CA1区神经细胞自噬的发生(每种方法每个时间点8只小鼠). 结果 1.SMS2-/-小鼠海马CA1区神经细胞自噬现象:电子显微镜下,模型组海马神经元内出现较多自噬体或自噬溶酶体样结构.光镜下,模型组P7、P14和P30 CA1区神经元自噬细胞数较对照组高(P＜0.01)；2.自噬相关蛋白Beclin-1对于自噬的调节作用:Beclin-1在模型组与对照组间的表达规律与微管相关蛋白1轻链3( MAPLC3)基本一致,P7、P14、P30模型组Beclin-1阳性细胞数明显多于对照组(P＜0.01).Beclin-1与MAPLC3两者在同一细胞中基本呈重叠表达；3.Western blotting检测各组海马CA1区神经细胞MAPLC3蛋白的相对表达量与上述结果一致. 结论 SMS2-/-小鼠海马神经细胞内神经酰胺增高,神经酰胺不仅促进细胞凋亡,同时促进自噬,造成小鼠海马神经细胞自噬现象增强.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邓锦波	河南大学神经生物学研究所	129	577	12.0	16.0
2	鲁广秀	河南大学淮河医院神经内科	24	164	7.0	12.0
3	臧建峰	河南大学神经生物学研究所	7	13	2.0	3.0
4	文曙光	河南大学神经生物学研究所	9	67	5.0	8.0
5	张俊士	河南大学淮河医院神经内科	19	67	5.0	8.0
6	曹瑞萍	河南大学神经生物学研究所	2	6	2.0	2.0