腺病毒与慢病毒载体转染离体兔角膜基质细胞的有效性对比研究

• 作者: 兰芬 吴宁玲 杜之渝 黄正
• 来源期刊: 眼科新进展
• 关键词: 腺病毒载体 慢病毒载体 绿色荧光蛋白 角膜基质细胞 基因转染
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 123-126
• 页数: 4页
• 字数: 3219字
• 语种: 中文

摘要

目的 观察比较腺病毒载体( adenovirus vector,AV)与慢病毒载体(lentivirus vector,LV)分别介导增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent proteins,EGFP)对体外培养的兔角膜基质细胞(rabbit corneal stroma cells,RCSC)的转染效率,探讨较优一种病毒载体作为角膜基因治疗载体的可行性.方法 行离体RCSC原代、传代培养及鉴定；实验分为转染组(AV-EGFP转染组和LV-EGFP转染组)和对照组,观察转染组在不同感染复数(multiplicity of infection,MOI)及感染后24h、48 h、72 h在倒置荧光显微镜下EGFP的表达情况,流式细胞技术检测转染效率.结果 AV -EGFP转染组感染RCSC后从24 ～48 h就开始可见明显的绿色荧光,起始时间早于LV-EGFP转染组(48h).LV-EGFP转染组在MOI≤1000时,随着MOI值增大,检测到的细胞转染率逐渐增大,两两比较差异均有统计学意义(均为P ＜0.05)；AV-EGFP转染组在MOI＞ 10时,随着MOI值增大,检测到的细胞转染率逐渐增大,两两比较差异均有统计学意义(均为P ＜0.05)；而在同一MOI值下(MOI＞1),LV-EGFP较AV-EGFP转染效率更高,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).结论 AV与LV均可有效转染离体RCSCs同一MOI值下(MOI＞1),LV转染效率更高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜之渝	重庆医科大学附属第二医院眼科中心	71	351	10.0	14.0
2	吴宁玲		16	76	5.0	7.0
3	兰芬	成都军区总医院眼科	7	14	3.0	3.0