三氧化二砷诱导的视网膜母细胞瘤SO-Rb50细胞自噬的研究

• 作者: 孟永 张平 张文忻 李永平 林健贤 郑健樑 黄丽琴
• 来源期刊: 中华实验眼科杂志
• 关键词: 视网膜母细胞瘤 自噬 化学疗法 微管相关蛋白轻链3
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1060-1064
• 页数: 5页
• 字数: 4602字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2012.12.002

摘要

背景 细胞的自噬是肿瘤细胞非凋亡形式的死亡过程,研究证实三氧化二砷(As2O3)可诱导肿瘤细胞凋亡,但As2O3是否可致SO-Rb50细胞发生自噬的研究鲜有报道. 目的 探讨As2O3体外诱导SO-Rb50细胞自噬的作用. 方法 用浓度为0.5、1.0、2.0、4.0tμmol/L的As2O3培养液及不含As2O3的未处理组处理SO-Rb50细胞系48 h,采用MTT法测定各As2O3浓度组SO-Rb50细胞的吸光度(A570)值.构建自噬标志物磷酸化绿色荧光蛋白(pGFP)-LC3体外转染SO-Rb50细胞,并分为新鲜RPMI-1640培养组(未处理组)、As2O3RPMI-1640培养组(As2O3处理组)和rapamycin培养组(阳性对照组),于48 h后行激光共焦显微镜检测细胞自噬；用自噬特异性染料单丹磺酰戊二胺(MDC)行荧光染色检测SO-Rb50细胞的自噬,并用透射电子显微镜检测SO-Rb50细胞的自噬表现,采用流式细胞仪定量检测不同浓度As2O3处理组自噬泡阳性细胞百分比. 结果 未处理组和0.5、1.0、2.0、4.0 μmol As2O3作用48 h后SO-Rb50细胞的A570值分别为2.194±0.066、1.841 ±0.213、1.035±0.046、0.374±0.042和0.167±0.019,总体比较差异有统计学意义(F=547.636,P＜0.05),其中各浓度As2O3组A570值均明显低于未处理组,差异均有统计学意义(均P=0.000).As2O3处理组和阳性对照组可见GFP-LC3融合蛋白呈点状聚集在相应的自噬泡,未处理组GFP-LC3呈弥散分布.透射电子显微镜检查可见未处理组SO-Rb50细胞超微结构正常,As2O3处理组和阳性对照组见大量双层膜状结构及自噬溶酶体.未处理组48 h见极少量MDC阳性荧光颗粒,As2O3处理组及阳性对照组48 h可见明显的MDC阳性荧光颗粒,聚集在细胞质相应的自噬发生区.流式细胞术检测发现未处理组和0.5、1.0、2.0、4.0 μmol/L As2O3及rapamycin作用48 h后自噬泡阳性的SO-Rb50细胞百分比分别为0、15.6％、42.7％、57.9％、79.5％和89.0％,随As2O3浓度的增加MDC阳性细胞百分比递增. 结论 As2O3抑制SO-Rb50细胞的生长和增生,并致SO-Rb50细胞发生自噬；SO-Rb50细胞经As2O3处理后,自噬的发生早于细胞核的改变,早中期自噬程度呈明显的As2O3浓度依赖性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张平	中山大学中山眼科中心	54	232	8.0	12.0
2	郑健樑	中山大学中山眼科中心	16	86	6.0	8.0
3	李永平	中山大学中山眼科中心	57	194	8.0	9.0
4	张文忻	中山大学中山眼科中心	21	107	6.0	9.0
5	林健贤	中山大学中山眼科中心	20	162	8.0	11.0
6	孟永	常州市第三人民医院眼科	1	3	1.0	1.0
7	黄丽琴	常州市第二人民医院眼科	1	3	1.0	1.0