山梨糖脱氢酶在脱氮副球菌中的表达

• 作者: 何建勇 张惟材 朱斌 汪建华 熊向华
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 山梨糖脱氢酶 脱氮副球菌 接合转移 酮古龙酸菌
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 204-206
• 分类号: Q78
• 字数: 2196字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2012.02.014

摘要

目的:在脱氮副球菌PD1222中表达山梨糖脱氢酶(SDH).方法:从质粒pMD-18T上复制氨苄西林抗性基因Ampr,从酮古龙酸菌中复制SDH基因sdh,先后酶切连接到pIND4质粒上,构建pIND4-Ampr-sdh穿梭质粒；再把pIND4-Ampr-sdh电转入大肠杆菌S17-1λpir作为供体菌,脱氮副球菌PD1222为受体菌进行双亲本接合转移；挑取壮观霉素和氨苄西林双抗平板上的接合子进行培养,菌液PCR复筛接合子,测序鉴定,通过DCIP法和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测阳性克隆的SDH活性.结果:构建的质粒pIND4-Ampr-sdh成功转入脱氮副球菌PDl222中,SDH获得表达并检测到其蛋白活性.结论:实现了SDH在脱氮副球菌中的表达,为在脱氮副球菌中研究SDH的下游电子传递链奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何建勇		55	294	10.0	14.0
2	熊向华	军事医学科学院生物工程研究所	46	135	6.0	9.0
3	汪建华	军事医学科学院生物工程研究所	46	163	6.0	10.0
4	张惟材	军事医学科学院生物工程研究所	75	603	13.0	22.0
5	朱斌	军事医学科学院生物工程研究所	2	2	1.0	1.0