美洲大蠊3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆及表达

• 作者: 张春林 王赟 龙高群
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 美洲大蠊 3-磷酸甘油醛脱氢酶 克隆 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 113-117
• 分类号: Q78
• 字数: 3162字
• 语种: 中文

摘要

旨在通过5’-RACE获得美洲大蠊3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因的全长cDNA序列,进行生物信息学分析,构建原核表达载体,诱导重组蛋白表达,为进一步研究其功能奠定基础.通过3’-RACE技术,PCR扩增获取编码美洲大蠊GAPDH蛋白的全长cDNA序列；采用生物信息学方法推导出该序列编码的氨基酸序列及其理化性质；预测信号肽、蛋白疏水性、可溶性、跨膜区结构、二级结构、三级结构,并构建系统发育树；构建原核表达载体pET28a-GAPDH,IPTG诱导重组蛋白表达,并用Histag抗体Western blotting验证.结果显示,美洲大蠊GAPDH基因,其完整阅读框含999个碱基,编码332个氨基酸.序列分析显示,该蛋白与家蚕GAPDH相似性为89％,具有GAPDH保守功能域,经IPTG诱导获得重组蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张春林	贵阳医学院生物学教研室	67	135	6.0	7.0
2	王赟	贵阳医学院生物技术教研室	14	72	6.0	7.0
3	龙高群	贵阳医学院生物学教研室	5	12	2.0	3.0