生鲜猪肉中含扩增内标的沙门氏菌Real-time PCR检测方法的建立

• 作者: 叶可萍 周光宏 姚大伟 徐幸莲 江芸
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 工学
• 关键词: 猪肉 沙门氏菌 实时荧光定量PCR 扩增内标
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 加工贮藏·质量安全
• 页码范围: 880-885
• 分类号: TS201.6
• 字数: 4325字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2012.04.036

摘要

建立含扩增内标的生鲜猪肉中沙门氏菌Real-time PCR检测方法,以提高检测的准确性.根据沙门氏菌ttrBCA基因设计引物和探针,利用犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因构建和目标基因相同引物的扩增内标,并对退火温度和引物、探针的浓度进行优化,建立含扩增内标的Real-time PCR检测方法,用该方法对人工污染生鲜猪肉样品进行检测.结果显示,该方法对19株非沙门氏菌检测结果均为阴性,对36株沙门氏菌检测结果均为阳性,特异性较好,热学裂解制备DNA模板法检测灵敏度达100 CFU/ml,试剂盒提取DNA制备模板法检测灵敏度达1μl2.66拷贝.在25μl反应体系中加入扩增内标103拷贝不影响目标基因的扩增,该方法能在12 h内对人工污染沙门氏菌的肉样做出检测.该方法不仅可快速检测生鲜猪肉中的沙门氏菌,同时避免了假阳性现象的产生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周光宏	南京农业大学肉品加工与质量控制教育部重点实验室	583	11626	50.0	71.0
2	徐幸莲	南京农业大学肉品加工与质量控制教育部重点实验室	469	8958	47.0	64.0
3	叶可萍	南京农业大学肉品加工与质量控制教育部重点实验室	12	87	5.0	9.0
4	江芸	南京师范大学金陵女子学院	40	556	15.0	21.0
5	姚大伟	南京农业大学肉品加工与质量控制教育部重点实验室	44	142	7.0	9.0