SOCS3过表达细胞模型的建立

• 作者: 刘威威 尹艳林 戴亚蕾 戴天耘
• 来源期刊: 同济大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞因子信号转导负调控蛋白3 基因克隆 真核表达 信号转导和转录激活因子3
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1-6
• 分类号: R392.12
• 字数: 4268字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0392.2012.04.001

摘要

目的 建立体外高表达细胞因子信号转导负调控蛋白3( suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)的细胞模型,为进一步研究SOCS3在炎症因子信号通路中的作用机制提供研究手段.方法 通过RT-PCR克隆SOCS3的编码片段,连接至pIRES2-EGFP真核表达质粒,经测序鉴定后,转染至293T细胞.通过荧光显微镜观测转染效率,RT-PCR和Western印迹法检测SOCS3表达情况,同时检测SOCS3高表达对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的信号转导和转录激活因子3 (signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)磷酸化的影响.结果 经测序证实,pIRES2-EGFP-SOCS3重建质粒中的SOCS3序列完全正确,转染后细胞中可见明显绿色荧光,且SOCS3在mRNA和蛋白水平表达均显著增加,过表达SOCS3可显著抑制由LPS诱导的STAT3的磷酸化.结论 成功构建SOCS3基因重组质粒,转染293T细胞,获得高表达具有功能性SOCS3分子.该细胞模型建立为进一步研究SOCS3的调节机制提供了有利工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	戴亚蕾	同济大学医学院免疫学教研室	20	121	6.0	10.0
2	刘威威	同济大学医学院免疫学教研室	3	5	1.0	2.0
3	戴天耘	同济大学医学院免疫学教研室	2	4	1.0	2.0
4	尹艳林	同济大学医学院免疫学教研室	1	1	1.0	1.0