茶树PPO融合蛋白真核表达载体的构建与表达

• 作者: 张丽霞 李智 王乃栋 韩晓阳 黄晓琴
• 来源期刊: 茶叶科学
• 学科: 农学
• 关键词: 茶树 多酚氧化酶 融合蛋白真核表达载体 巴斯德毕赤酵母 诱导表达
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 页码范围: 269-275
• 分类号: S571.1|Q554
• 字数: 3862字
• 语种: 中文

摘要

以迎霜品种茶树基因组为模板,利用高保真聚合酶pfu,通过PCR方法扩增得到茶树PPO基因的编码区序列.通过设计酶切引物将其成功融合至真核表达载体pPICZa中,构建出茶多酚氧化酶的融合蛋白真核表达载体pPICZa-PPO,并将其转化进入巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris) GS115中,成功筛选出多个阳性转化子.对阳性转化子进行甲醇诱导,采用Western-Blotting方法在培养液中成功检测到诱导表达的目的蛋白.酶活检测结果也显示诱导产物具有较高的相对酶活性,能够正确发挥酶蛋白的生物功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张丽霞	山东农业大学园艺科学与工程学院	81	918	14.0	26.0
3	黄晓琴	山东农业大学园艺科学与工程学院	27	227	8.0	14.0
9	韩晓阳	山东农业大学园艺科学与工程学院	12	57	4.0	7.0
13	王乃栋	山东农业大学园艺科学与工程学院	4	20	3.0	4.0