沉默白细胞介素10基因对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的影响

• 作者: 万小平 刘珺 杨鑫 王红宁 田永帅 陈义辉 高荣
• 来源期刊: 四川大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪IL-10基因 RNA干扰 基因表达 猪繁殖与呼吸综合征病毒 免疫细胞
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 生物学
• 页码范围: 1357-1363
• 页数: 7页
• 分类号: Q78
• 字数: 4325字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0490-6756.2012.06.033

摘要

为了研究藏猪免疫细胞中IL-10基因表达抑制后对RNA病毒感染及其免疫应答的影响,本实验构建和筛选了抑制猪IL-10基因表达的shRNA干扰分子及其表达载体,并以新型的壳聚糖接枝聚乙二醇和聚乙烯亚胺修饰分子(CS-N-PEI-PEG)通过离子交联法进行分子包装,制备DNA-壳聚糖纳米分子,体外转染藏猪免疫细胞,观察猪繁殖和呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)诱导免疫细胞IL-10基因的表达及其增殖感染水平.实验结果表明:与未转染纳米分子或者纳米分子不表达shRNA的空白对照组相比较,shRNA实验组的IL-10基因表达在24～72 h内明显抑制(P＜0.05),免疫细胞中PRRSV的增殖水平显著下降(P＜0.05)；同时IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ基因的mRNA水平明显升高(P＜0.05).这些提示IL-10的shRNA转染能使免疫细胞的抗感染能力显著增强,甚至可完全抑制PRRSV的复制.