人血清白蛋白在乳酸克鲁维酵母中的表达

• 作者: 付莉莉 关波 李华钟 段作营 金坚 陈蕴 雷楗勇
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 生物学
• 关键词: 人血清白蛋白 乳酸克鲁维酵母 分泌表达
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 55-60
• 分类号: Q786
• 字数: 3276字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2012.05.011

摘要

以乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis,K.lactis)GG799为宿主对人血清白蛋白(HSA)进行分泌表达.以pPIC9k-HSA为模板,采用带有Xho Ⅰ和NotⅠ酶切位点的引物PCR扩增获得HSA基因,经XhoI和NotI双酶切后插入pKLAC1,构建表达载体pKLAC1 -HSA.经SalⅡ线性化后,电击转化K.lactis GG799,用含5 mmol/L乙酰胺的YCB平板筛选阳性转化子.提取基因组DNA,采用PCR方法对转化子鉴定后进行摇瓶发酵.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot分析发酵上清液中的表达产物,并初步分析酵母基础N源(YNB)对HSA在K.lactis GG799中表达的影响.结果表明,HSA成功在K.lactis GG799中分泌表达,表达量为81μg/mL,遗传稳定性好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金坚	江南大学医药学院	196	1025	16.0	22.0
2	段作营	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	84	674	14.0	21.0
3	陈蕴	江南大学医药学院	85	685	13.0	23.0
4	李华钟	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	63	592	13.0	22.0
5	雷楗勇	江南大学医药学院	19	86	5.0	8.0
6	关波	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	4	36	3.0	4.0
7	付莉莉	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	1	2	1.0	1.0