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摘要:
克隆山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV)的群抗原基因gag,并通过原核表达系统对gag进行表达研究.参照GenBank中收录的山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV-2) gag基因序列设计1对特异引物,以地方性鼻内腺癌(ENA)山羊鼻内分泌物中病毒RNA为模板,RT-PCR扩增获得目的片段,并将产物连接到pMD18-T载体获得阳性克隆(pMD18-gag)并测序.根据gag基因的ORF设计1对表达用引物进行亚克隆,并将ORF重组到pET-32,重组质粒转化至宿主菌Rostta中,用IPTG诱导表达,对表达的蛋白用SDS-PAGE分析,纯化表达产物,通过ELISA初步分析产物的反应原性.结果显示:克隆获得长2 249 bp的核酸序列(GenBank:HM104174),含有完整的ORF,与已报道的ENTV-2 gag基因的同源性高达87%,氨基酸水平上的同源性高达96.4%.表达产物大小约87 ku,与理论推理一致.采用ELISA方法检测表达产物未能与ENA阳性血清发生特异性反应.结果表明:gag基因在原核系统pET-32/Rostta中得到表达,表达产物与ENA阳性血清不具反应原性.
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文献信息
篇名 山羊地方性鼻内肿瘤病毒SC株gag基因分子克隆与原核表达
来源期刊 畜牧与兽医 学科 农学
关键词 山羊 ENTV gag基因 原核表达
年,卷(期) 2012,(2) 所属期刊栏目 兽医科技
研究方向 页码范围 70-73
页数 分类号 S858.27
字数 2629字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 颜其贵 四川农业大学动物生物技术中心 107 551 11.0 17.0
5 何桦 四川农业大学动物遗传育种研究所 12 21 3.0 4.0
6 冯迎春 四川农业大学动物生物技术中心 19 71 5.0 7.0
7 张霞 2 6 1.0 2.0
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