高产琥珀酸菌株的通量筛选

• 作者: 于芳 倪晔 孙志浩 张坤坤 董晋军 郑璞
• 来源期刊: 工业微生物
• 学科: 工学
• 关键词: 琥珀酸 通量筛选 磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶(PEPCK)
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 11-16
• 分类号: TQ460.38
• 字数: 2549字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2012.01.003

摘要

以琥珀酸放线杆菌Actinobacillus succinogenes F3-21为出发菌株,分别用吖啶黄、紫外线、紫外线-硫酸二乙酯和亚硝基胍进行诱变,产生突变菌库.用“96孔板培养-HPLC浓缩检测.厌氧瓶复筛”的模式筛选高产突变株.从1056株突变株中,筛选到一株高产菌株Ⅵ-10-C.连续传代10次,产酸水平不变.在5L发酵罐中补料分批发酵72 h,Ⅵ-10-C产琥珀酸87.6 g/L,生产强度1.22 g/(L·h),糖酸转化率0.66 g/g;琥珀酸产量比出发菌提高了30％.代谢通量与关键酶活性分析表明:相比于F3-21,Ⅵ-10-C发酵过程中从磷酸烯醇式丙酮酸节点处流向草酰乙酸的代谢流量增加了28.9％,相对应的磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶(PEPCK)酶活提高了23.5％.结果表明用“96孔板培养-HPLC浓缩检测-厌氧瓶复筛”的模式能快速有效筛选高产琥珀酸菌株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董晋军	工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院	4	55	3.0	4.0
2	郑璞	工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院	10	118	6.0	10.0
3	孙志浩	工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院	11	151	7.0	11.0
4	倪晔	工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院	8	78	4.0	8.0
5	张坤坤	工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0
6	于芳	工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0