TaqMan MGB探针实时荧光定量-聚合酶链反应检测人粒细胞无形体Msp2基因方法的建立

• 作者: 付秀萍 张景山 王景泉 贺金荣
• 来源期刊: 疾病监测
• 学科: 医学
• 关键词: 人粒细胞无形体 real-time PCR Taq-Man MGB探针 豪猪血蜱
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 141-144
• 分类号: R376
• 语种: 中文
• DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2012.2.018

摘要

目的 建立敏感、特异、实时荧光定量-聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative,FQ-PCR)方法,用于人粒细胞无形体病的检测.方法 根据无形体特异外膜蛋白Msp2基因为靶基因设计引物以及TaqMan MGB探针,建立FQ-PCR方法,并对湖北省随州和河北省张家口地区的蜱标本进行了检测.结果 本研究建立的TaqMan MGB探针具有良好的特异性,建立的FQ-PCR标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r=0.99),灵敏性评估发现每个20 μl PCR反应管中只要有35个拷贝的目的基因即可被检测到,即最低检出浓度为2拷贝/μl,并且具有较好的重复性.共检测蜱标本426只,其中豪猪血蜱253只,共49组,阳性7份.结论 本研究建立的FQ-PCR方法具有很高的特异性和敏感性,可用于人粒细胞无形体感染的快速检测.进一步证实了豪猪血蜱可能是粒细胞无形体的媒介宿主.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	付秀萍	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	6	54	5.0	6.0
2	贺金荣	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	5	30	3.0	5.0
3	张景山	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	6	64	5.0	6.0
4	王景泉	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	2	10	2.0	2.0