利用酵母双杂交系统筛选水稻类受体激酶OsWAK50胞内域相互作用蛋白

• 作者: 孙丽静 孙颖 张芊 路铁刚
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 关键词: 水稻 细胞壁连接的类受体激酶(WAK) 酵母双杂交 蛋白质相互作用
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 438-447
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1206.2011.00357

摘要

细胞壁连接的类受体激酶(wall-associated kinase,WAK)是植物细胞中一类特有的类受体激酶基因亚家族,因其胞外域与细胞壁紧密相连而得名.水稻中共有125个OsWAK基因,OsWAK50编码的蛋白质具有胞外域、跨膜域和激酶域,呈现典型的WAK样受体激酶特征.首先通过对OsWAK50-GFP融合蛋白的观察发现OsWAK50定位于细胞膜并且与细胞壁偶联.进而通过酵母双杂交系统筛选到了20个可能与OsWAK50胞内域相互作用的候选蛋白,并通过一对一酵母转化验证了OsSK4、OsSWIB和OsSWI3C全长均可与OsWAK50胞内域相互作用.进一步分析显示,OsSWIB能够直接与OsWAK50激酶域互作,而OsSK4和OsSWI3C与OsWAK50胞内域的互作是依赖于OsWAK50 C端的.研究还表明,OsSK4和OsSWIB亦能与OsWAK50同源基因OsWAK53a结合,而OsSWI3C则不能与OsWAK53a结合.双分子荧光互补实验证明,OsSK4与OsWAK50和OsWAK53a能够在植物体内发生互作.以上结果为阐明OsWAK50发挥功能的分子机制提供了重要线索.