慢病毒介导的c-met RNA干扰对人乳头状甲状腺癌K1细胞生物学行为的影响

• 作者: 刘泽兵 桂律 王丽 郑时玉
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 甲状腺肿瘤 原癌基因,c-met 慢病毒载体 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1819-1824
• 分类号: R736.1
• 字数: 4858字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2012.10.016

摘要

目的:探讨c-Met在乳头状甲状腺癌(PTC)中的表达;构建针对人c-met基因的RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,并观察其对K1细胞c-met基因的沉默效应及对细胞生物学行为的影响.方法:免疫组化方法检测35例乳头状甲状腺癌及25例良性甲状腺疾病手术切除标本中c-Met的表达;构建人c-met基因的RNAi慢病毒载体,应用荧光定量RT-PCR与Western blotting检测其对c-met的干扰效率,应用克隆形成实验、流式细胞术、划痕实验和Transwell实验检测其对细胞克隆形成、周期、迁移、侵袭能力的影响,应用裸鼠模型评估RNA干扰后细胞成瘤能力的影响.结果:c-Met在PTC中的表达明显高于良性甲状腺组织;成功构建了c-met RNAi慢病毒载体,RT-PCR及Western blotting实验显示其对乳头状甲状腺癌K1细胞c-met mRNA 及蛋白表达的抑制均较明显;克隆形成实验显示c-met RNAi慢病毒载体能够抑制K1细胞的克隆形成能力;流式细胞术检测显示c-met RNAi慢病毒载体能够减少S细胞比列;划痕实验及Transwell实验显示c-met RNAi慢病毒载体能够抑制细胞迁移和侵袭;裸鼠成瘤实验显示RNA干扰后细胞的成瘤能力降低.结论:c-met RNAi慢病毒载体能够抑制K1细胞的克隆形成能力、细胞周期进程、迁移、侵袭及成瘤能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	桂律	复旦大学附属金山医院病理科	38	154	7.0	10.0
2	王丽	复旦大学附属金山医院病理科	90	549	14.0	18.0
3	刘泽兵	复旦大学附属金山医院病理科	13	72	6.0	7.0
4	郑时玉	复旦大学附属金山医院病理科	2	12	1.0	2.0