音猬因子调控BMSCs表达和分泌VEGF及bFGF的实验研究

• 作者: 蔡加琴 谢红蕾 邓力 陈晓禾 黄永灿 黄益洲
• 来源期刊: 中国修复重建外科杂志
• 关键词: 音猬因子 BMSCs 缺血性相关疾病 骨修复 VEGF bFGF 大鼠
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 干细胞与组织工程
• 页码范围: 112-116
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

目的 音猬因子(Sonic hedgehog,Shh)介导的信号参与调控血管生成的重要环节.研究不周浓度的重组Shh-N(recombinant Shh N-termitant,rShh-N)对BMSCs表达和分泌VEGF和bFGF的影响.方法 取健康3日龄SD大鼠骨髓分离培养BMSCs,体外扩增至第3代,分别用含0、10、100、200 ng/mL rShh-N的L-DMEM培养BMSCs,作为A、B、C、D组.培养12、24、48、72 h后行ELISA法检测各组上清液中VEGF和bFGF的浓度,实时荧光定量PCR法检测各组VEGF和bFGF mRNA的表达水平.结果 在基因表达水平上,D组各时间点的VEGF和bFGF mRNA表达量均明显高于A组(P＜0.05),且在12、48 h表达量高于24、72 h(P＜0.01);C组在各时间点均促进bFGF mRNA表达(P＜ 0.05),在24～72 h促进VEGF mRNA表达(P＜0.05),且在72 h时表达量均最高(P＜0.01);B组在12h抑制VEGFmRNA表达(P＜0.05),48 h和72 h表现出促进作用(P＜0.05),在12～48 h明显促进bFGF mRNA表达(P＜0.05),且在48 h时的表达量最高(P＜0.01).在蛋白水平上,D组各时间点VEGF和bFGF分泌量均高于A组(P＜0.01);C组在24～72h VEGF和bFGF分泌量明显多于A组(P＜0.05);B组在12h和48 h抑制VEGF的分泌(P＜0.05),24 h增加其分泌作用(P＜0.05),而在24 h和48 h促进bFGF的分泌(P＜0.05).各组在48 h和72 h时的VEGF和bFGF分泌量明显多于12h和24h(P＜ 0.05).结论 rShh-N可促进BMSCs表达和分泌VEGF和bFGF,为进一步探讨rShh-N和MSCs联合应用于治疗缺血性相关疾病以及促进骨修复重建的可行性提供了实验依据.