白色念珠菌菌丝相培养条件及RAPD反应体系优化的研究

• 作者: 厉荣玉 王萍 董群 钱森和
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白色念珠菌 菌丝相 RAPD反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 21-26
• 分类号: R379.4
• 字数: 4681字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2012.01.005

摘要

目的 优化白色念珠菌菌丝相培养条件,为白色念珠菌菌丝相的分子生物学研究提供必要条件;建立白色念珠菌菌丝相RAPD的最佳反应体系,应用于其基因组DNA扩增.方法 在RPMI1640培养基的基础上,通过单因素试验研究了小牛血清用量、培养液pH值、培养温度和转种次数等对白色念珠菌菌丝相形成的影响.采用单因素试验,分别研究了Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq酶的浓度、引物浓度和模板DNA浓度对白色念珠菌菌丝相RAPD反应的影响;应用L16(45)正交试验对RAPD反应条件进行了优化.结果 白色念珠菌菌丝相诱导的最佳条件为:每100 ml培养液中的小牛血清用量为10 ml,培养液pH值为7.5,培养温度为36 ℃,转种次数为12次.白色念珠菌菌丝相的最适RAPD反应体系为:Mg2+1.25 mmol/L、dNTPs 0.4 mmol/L、随机引物0.1 μmol/L、TaqDNA聚合酶5 U/50 μl、模板DNA 495 ng/50 μl.结论 通过单因素和正交试验,获得了较适白色念珠菌菌丝相培养条件和其基因组RAPD扩增条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董群	皖南医学院微生物学与免疫学教研室	74	497	12.0	19.0
2	钱森和	安徽工程大学生化学院	40	216	9.0	12.0
3	厉荣玉	皖南医学院微生物学与免疫学教研室	23	149	9.0	10.0
4	王萍	皖南医学院微生物学与免疫学教研室	26	96	6.0	9.0