多疣壁虎tubulin beta 3基因克隆和多克隆抗体制备

• 作者: 刘梅 刘炎 李静 秦勇 顾云
• 来源期刊: 动物学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 多疣壁虎 Tubulin beta 3 分子克隆 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 395-401
• 分类号: Q959.62|Q349|Q786|Q511
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1141.2012.04395

摘要

Tubulin beta 3 (TUBB3)是特异表达于神经元的微管蛋白tubulin beta家族成员,被认为在维持轴突正常状态起着重要作用,是神经元特异的标志蛋白.该研究旨在获得多疣壁虎TUBB3全长cDNA序列并制备其多克隆抗体,为进一步研究多疣壁虎断尾再生提供基因和抗体工具.根据多疣壁虎中枢神经组织cDNA文库中TUBB3的EST片段序列,采用RACE-PCR方法,获得了全长cDNA,序列全长1790 bp,编码450个氨基酸,与其他物种TUBB3蛋白高度同源;RT-PCR方法和Northern blotting检测了TUBB3组织表达谱及其转录本的大小；在GenBank登录号为JQ080315; NJ法构建的系统进化树分析表明,多疣壁虎的TUBB3蛋白与鸡的TUBB3蛋白在进化距离上较近；构建pET-32a-TUBB3原核表达载体,诱导表达并纯化TUBB3蛋白,获得兔抗壁虎TUBB3多克隆抗体,ELISA检测其效价大于1∶65 536,Western blotting方法证实所制备的多克隆抗体可特异识别多疣壁虎神经组织的的TUBB3蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘梅	南通大学江苏省神经再生重点实验室	33	74	5.0	7.0
2	刘炎	南通大学江苏省神经再生重点实验室	14	43	5.0	6.0
3	李静	南通大学江苏省神经再生重点实验室	5	24	3.0	4.0
7	秦勇	南通大学江苏省神经再生重点实验室	1	2	1.0	1.0
8	顾云	南通大学江苏省神经再生重点实验室	4	4	1.0	1.0