副猪嗜血杆菌OMP5的克隆表达及其对豚鼠免疫保护作用

• 作者: 王海峰 王萍 黄冬艳 黄建珍
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 副猪嗜血杆菌 外膜蛋白P5 原核表达 豚鼠 亚单位疫苗
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 26-30
• 分类号: S852.61|S852.4
• 字数: 4007字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中登录的副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5(outer membrane protein P5,OMP5)基因序列设计1对特异性引物,以江西分离株NC0807基因组DNA为模板,扩增出OMP5基因.将其克隆到pEf-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-28a-OMP5,质粒转化大肠杆菌BL21( DE3),通过SDS-PAGE和Western blotting分析重组蛋白的表达情况和反应原性.重组蛋白经镍柱亲和层析纯化后免疫豚鼠,测定其免疫原性和保护效率.结果表明,重组蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达.表达的蛋白分子质量约为43 ku,能被副猪嗜血杆菌阳性血清识别.动物试验结果表明,重组蛋白免疫后能诱导产生高水平的OMP5特异性抗体,并可显著保护豚鼠抵抗副猪嗜血杆菌强毒菌株的攻击,提示OMP5是副猪嗜血杆菌的保护性抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄建珍	江西农业大学动物科学技术学院	22	76	4.0	8.0
2	王萍	江西农业大学动物科学技术学院	74	444	14.0	17.0
3	黄冬艳	江西农业大学动物科学技术学院	23	45	4.0	5.0