一个棉花锌结合蛋白质(ZnBP)基因的克隆及原核表达

• 作者: 刘毅 周翠平 岳显可 杨玲 王微娜 蔡应繁
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 棉花 腺体 锌结合蛋白质 原核表达 Western blotting
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·耕作栽培·生理生化
• 页码范围: 18-23
• 分类号: S312
• 字数: 4206字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2012.01.004

摘要

为了解棉花锌结合蛋白的理化性质及结构特征,从已构建完成的棉花(湘棉18)腺体形成时期的cDNA均一化文库中筛选出1个棉花锌结合蛋白质(Zinc binding protein,ZnBP)基因的全长cDNA序列.经过克隆、测序及序列分析,发现该片段包含1个完整开放阅读框,长654个碱基,编码217个氨基酸,蛋白质分子量为2.46×104,等电点为9.33.以湘棉18叶片DNA为模板,通过PCR扩增分离获得棉花ZnBP基因.经测序拼接,得到1 731 bp的棉花gDNA片段,编码区含有3个内含子.利用pET-28a(+)载体,开展了该基因的原核表达研究,在37℃、异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)终浓度1 mmol/L、诱导时间8h和转速150r/min条件下,实现最优表达；SDS-PAGE凝胶电泳及Western blotting检测分析结果表明,蛋白表达正确.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡应繁	重庆邮电大学生物信息学院	31	198	7.0	12.0
2	刘毅	成都中医药大学药学院	45	205	9.0	11.0
6	王微娜	重庆邮电大学生物信息学院	4	11	2.0	3.0
7	杨玲	重庆邮电大学生物信息学院	3	4	1.0	2.0
8	岳显可	成都中医药大学药学院	3	8	1.0	2.0
12	周翠平	重庆邮电大学生物信息学院	1	1	1.0	1.0